Elektroforez ve DNA Fragman Uzunluğu Tayini Laboratuvarı Aktivitesi

Sorum var

Açıklama
Gerekli

Kısıtlama enzimleri, DNA molekülünün baz dizisine dayalı olarak çok spesifik noktalarda DNA moleküllerini parçalayabilen veya kesebilen enzimlerdir. 20. yüzyılın ikinci yarısında keşifleri ve tecritleri, bilim insanlarına paha biçilmez bir araç sağladı ve moleküler biyoloji alanında hızla genişledi. Agaroz elektroforezi, kısıtlama enzimlerinin kullanımından kaynaklanan DNA parçalarını ayırmak için bir tekniktir. Bu aktivitede öğrenciler kısıtlama enzimleri ile tedavi edilmiş üç DNA örneği üzerinde agaroz elektroforezi gerçekleştireceklerdir. Bir numune HindIII enzimi ile kesilmiş, biri EcoRI enzimi ile kesilmiş, diğeri ise her iki enzimle kesilmiştir. Agaroz jel üzerinde elde edilen DNA bantları paterni, her enzimin DNA'yı farklı şekilde etkilediğini gösterecektir. Öğrenciler sadece DNA elektroforezi sürecini öğrenmekle kalmayacak, aynı zamanda agaroz jeli kurma, agaroz jeline DNA örnekleri yükleme ve DNA bantlarını görselleştirmek için jeli boyama gibi süreçle ilişkili teknikleri öğreneceklerdir. Ayrıca, sonuçlarını inceledikten sonra bilinmeyen DNA fragmanlarının boyutlarını nasıl belirleyeceklerini de öğreneceklerdir. Kit, soğutma veya dondurma gerektirmeyen özel olarak işlenmiş DNA örnekleri, sıcak su banyosunda veya mikrodalgada eritilebilen hazırlanmış agaroz, TBE elektroforez tamponu ve DNA lekesi içerir. 10 jeli çalıştırmak için yeterli DNA vardır.

Kit İçeriği:

200 mL Hazırlanmış Agaroz,% 0.8 Çözelti
500 mL Tris Borat ETA Tamponu, 5X
60 mL DNA Leke, 20X
100 μL Lambda DNA / EcoRI Yükleme Boyası ile Özümleme
Yükleme Boyası ile 100 µL Lambda DNA / HindIII Özeti
100 µL Lambda DNA / EcoRI, Yükleme Boyası ile HindIII Özeti